临床儿科杂志 ›› 2016, Vol. 34 ›› Issue (4): 292-.doi: 10.3969 j.issn.1000-3606.2016.04.012
余琴梅, 吴婷婷, 诸凤, 谢沅, 吴蓉洲
YU Qinmei, WU Tingting, ZHU Feng, XIE Yuan, WU Rongzhou
摘要: 目的 探讨病毒性心肌炎(VMC)中存活素蛋白的表达变化及可能机制。方法 以柯萨奇病毒B3(CVB3)感染SD乳鼠原代心肌细胞复制VMC细胞模型,在CVB3感染后0、12、24、36、48、60 h 观察心肌细胞形态及搏动情况,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验评估心肌细胞损伤程度,Annexin V-FITC/PI 双染法流式细胞术检测细胞凋亡,采用Western blot技术检测抗凋亡蛋白存活素及凋亡酶cleaved-caspase-3 的表达。结果 CVB3感染48 h 后,乳鼠原代心肌细胞开始出现团缩变圆,搏动减弱、不规则,至60 h 时大部分细胞停止搏动,细胞脱壁、溶解。CVB3病毒感染至细胞凋亡在60 h 时至高峰(35.85±3.76)%。感染CVB3后,心肌细胞存活素蛋白表达明显增加,12 h 即至最高峰(1.88±0.39),为正常组的1.88倍;随后存活素蛋白表达逐渐减少,60 h 时至最低点(0.47±0.41)。CVB3病毒感染激活心肌细胞cleaved-caspase-3 表达,60 h 时至高峰(3.46±0.16)。心肌细胞存活素蛋白表达量与细胞凋亡率及cleaved-caspase-3 表达量均存在显著负相关(r = -0.727、-0.677,P < 0.01)。结论 VMC时存活素蛋白表达增加,可能在早期参与抗心肌细胞凋亡作用。